Tutto quello che c'è da sapere sulla Coltivazione Lowenstein
In sostanza, la coltura di Lowenstein è una base per lo sviluppo dei micobatteri, attraverso il loro isolamento. In questo modo, i nutrienti forniti da questa tecnica favoriscono la crescita dei micobatteri.
Nella cultura Lowenstein, la malachite rende difficile lo sviluppo della flora microbica che può contaminare ed essere dannosa . Inoltre, con un apporto di glicerina, viene stimolata la crescita del cosiddetto Mycobacterium tuberculosis, oltre che di micobatteri sale-tolleranti, come M. smegmatis.
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Al momento dell'impianto di queste colture, si consiglia di inoculare nel campo da coltivare campioni preventivamente decontaminati .
- 1 passaggio prima della coltivazione
- 2 Composizione
- 3 Un metodo di riferimento
- 4 Cultura di Löwenstein-Jensen e tubercolosi
- 5 Un altro metodo simile, lo Stonebrink
Fase di pre-coltivazione
Prima della cultura Lowenstein, viene effettuata la decontaminazione , poiché ci sono microrganismi della flora che crescono molto rapidamente. Pertanto, è necessario procedere all'eliminazione dei microrganismi più contaminanti, che impediranno lo sviluppo di micobatteri.
Nel periodo della semina o dell'incubazione l'ideale è una temperatura di 35-37 gradi. È necessario attendere un periodo compreso tra 1 e 3 mesi , poiché i micobatteri sono a crescita lenta.
Composizione
La composizione di questo tipo di colture è costituita da: fecola di patate, solfato di magnesio, citrato di magnesio, asparagi, che è fonte di azoto, glicerina, che funge da fonte di carbonio, verde malachite, che inibisce la crescita di altri tipi di colture batteri, acqua purificata, ecc.
Un metodo di riferimento
Nonostante l'uso di sistemi automatizzati con mezzi liquidi si sia diffuso nella pratica dei laboratori sperimentali per l'agricoltura, a causa della rapidità dei suoi effetti e della velocità di recupero dei micobatteri, è ancora necessario disporre di particelle solide .
Fondamentalmente a causa di alcuni inconvenienti che la cultura Lowenstein presenta, come la possibile contaminazione di media e canali , il che significa dover utilizzare supporti solidi in parallelo che minimizzino questi svantaggi.
Come si può vedere, a seguito di diversi studi effettuati e test nei laboratori di tutto il mondo, è stato dimostrato che il terreno di Löwenstein-Jensen continua ad essere il riferimento per la valutazione di nuovi e innovativi sistemi commerciali e viene abitualmente utilizzato per l'isolamento di micobatteri clinicamente importanti .
Sebbene il suo grado di efficacia sia accettabile, le sue prestazioni non sono sempre le più desiderabili, tra l'altro perché la perdita di agenti positivi si verifica molto frequentemente .
Questi inconvenienti sono stati risolti creando mezzi complementari che aumentano la resa della cultura Löwenstein-Jensen inoculandoli in parallelo.
Cultura di Löwenstein-Jensen e tubercolosi
L'utilizzo di terreni liquidi per la diagnosi della tubercolosi, rispetto ai terreni solidi, sta portando a miglioramenti nella rilevazione dei micobatteri, nonché ad un recupero maggiore e più efficace degli stessi, accorciando i tempi, per stabilire diagnosi microbiologiche.
L'utilizzo di sistemi commerciali automatizzati favorisce l'elaborazione dei dati ottenuti, l'elaborazione dei campioni e la lettura dei risultati.
Un altro metodo simile, lo Stonebrink
Sulla base degli studi effettuati sull'utilizzo di un mezzo solido invece di uno liquido, l'utilizzo delle tecniche Stonebrink sembra consigliabile. Ma non utilizzato esclusivamente; Idealmente, dovrebbe essere utilizzato parallelamente al mezzo Löwenstein-Jensen.
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